(Voolutsütomeetria, FCM) on rakuanalüsaator, mis mõõdab värvitud rakumarkerite fluorestsentsi intensiivsust. See on kõrgtehnoloogia tehnoloogia, mis on välja töötatud üksikute rakkude analüüsi ja sortimise põhjal. See suudab kiiresti mõõta ja klassifitseerida rakkude suuruse, sisemise struktuuri, DNA, RNA, valkude, antigeenide ja muude füüsikaliste või keemiliste omaduste ning nende klassifikatsioonide kogumisel.
Voolutsütomeeter koosneb peamiselt järgmistest viiest osast:
1 voolukamber ja vedeliku süsteem
2 laservalgusallikas ja tala kujundussüsteem
3 optiline süsteem
4 Elektroonika, salvestus-, kuvamis- ja analüüsisüsteem
5 raku sortimissüsteem
Nende hulgas on voolutsütomeetria fluorestsentsisignaalide peamine mõõtmine laseri ergutamisel laservalgusallika ja tala moodustamissüsteemis. Ergastusvalguse intensiivsus ja kokkupuute aeg on seotud fluorestsentssignaali intensiivsusega. Laser on ühtne valgusallikas, mis võib pakkuda ühe lainepikkust, kõrge intensiivsuse ja kõrge stabiilsusega valgustust. Nendele nõuetele vastamiseks on ideaalne ergastuse allikas.
Laseriallika ja voolukambri vahel on kaks silindrilist läätsi. Need läätsed keskenduvad laserkiirga, mille ümmargune ristlõige, mis eraldub laseristiallikast elliptiliseks talaks väiksema ristlõikega (22 μm × 66 μm). Selle elliptilise tala laserienergia jaotub vastavalt normaalsele jaotusele, tagades laserte tuvastamise piirkonda läbivate rakkude järjepideva valgustuse intensiivsuse. Teisest küljest koosneb optiline süsteem mitmest läätsede, näpunäidete ja filtrite komplektist, mida võib laias laastus jagada kahte rühma: voolukambrist üles- ja allavoolu.
Voolukambri ees olev optiline süsteem koosneb läätsest ja näpunäidetest. Läätse ja näpunäidete (tavaliselt kaks läätse ja näpunäide) peamine funktsioon on laserkiir'i keskendumine ümmarguse ristlõikega, mille laseri allikas kiirgab väiksema ristlõikega elliptiliseks talaks. See jaotab laserienergia vastavalt normaalsele jaotusele, tagades rakkude järjepideva valgustuse intensiivsuse kogu laseri tuvastamispiirkonnas ja minimeerides hulkuva valguse häireid.
Filtreid on kolm peamist tüüpi:
1: pikk läbipääsufilter (LPF) - võimaldab ainult valgust, mille läbimine on suurem kui konkreetne väärtus.
2: lühisfilter (SPF) - võimaldab ainult valgust, mille läbimine on konkreetsest väärtusest madalam.
3: BandPass -filter (BPF) - võimaldab valgust ainult konkreetses lainepikkuse vahemikus läbi viia.
Erinevad filtrite kombinatsioonid võivad suunata fluorestsentsisignaale erinevatel lainepikkustel üksikute fotoloogiliste torudeni (PMTS). Näiteks on PMT ees rohelise fluorestsentsi (FITC) tuvastamise filtrid LPF550 ja BPF525. Oranžipunase fluorestsentsi (PE) tuvastamiseks PMT ees kasutatavad filtrid on LPF600 ja BPF575. PUNANE FILORESESSE (CY5) tuvastamise filtrid PMT ees on LPF650 ja BPF675.
Voolutsütomeetriat kasutatakse peamiselt rakkude sortimiseks. Arvutitehnoloogia edendamise, immunoloogia arendamise ja monoklonaalse antikehade tehnoloogia leiutamise, selle rakendused bioloogias, meditsiinis, apteegis ja muudes põldudes muutuvad üha levinumaks. Need rakendused hõlmavad raku dünaamika analüüsi, rakkude apoptoosi, rakkude kirjutamist, kasvaja diagnoosimist, ravimite efektiivsuse analüüsi jne.
Postiaeg: 21. september2023
